Qolgi metodu

Qolgi texnikası ilə boyanmış insan neokortikal piramidal neyron. Soma üzərində şaquli uzanan apikal dendritə və hüceyrə gövdəsinin əsasından yan tərəfə yayılan çoxsaylı bazal dendritlərə diqqət yetirin.

Camillo Qolgi tərəfindən gümüş nitrat üsulu ilə boyanmış bir hipokampus

Santiago Ramón İ Kajal tərəfindən serebellar korteksdə Purkinje hüceyrəsinin çəkilməsi, incə detalları aşkar etmək üçün Qolgi boyama texnikasının gücünü nümayiş etdirir.

Qolgi metodu (üsulu) — işıq mikroskopiyası altında sinir toxumasını görüntüləmək üçün istifadə edilən gümüş rəngləmə üsulu. Metod 1873-cü ildə bu üsulla çəkilmiş ilk fotoşəkili nəşr edən italyan həkim və alim Kamillo Qolgi tərəfindən kəşf edilmişdir.

Əvvəlcə Qolgi qara reaksiyası (la reazione nera) adlanırdı sonra daha çox Qolgi ləkəsi və nəhayət Qolgi üsulu kimi tanındı.

Qolgi boyanması ispan neyroanatomu Santiaqo Ramón i Kajal (1852-1934) tərəfindən sinir sisteminin təşkili ilə bağlı bir sıra yeni faktlar aşkar etmək üçün istifadə edilmişdir ki, bu da neyronların öyrənilməsinin yaranmasına kömək etmişdi. Nəhayət, Ramon i Kajal "ikiqat emprenye" ​​adlandırdığı üsulu tətbiq edərək texnikanı təkmilləşdirdi. Bu gün də istifadə olunan Ramon i Kajal boyama texnikası Kajal boyanması adlanır.

Mexanizmi

Sinir toxuması hüceyrələri sıx şəkildə yığılır və bütün hüceyrələri rəngləyərkən onların quruluşu və əlaqələri haqqında az məlumat əldə etmək olar. Bundan əlavə, neyron aksonları və dendritlər də daxil olmaqla sinir hüceyrələrinin incə sap kimi prosesləri adi rəngləmə üsulları ilə görünməyəcək qədər nazik və şəffafdır.

Qolgi metodu məhdud sayda hüceyrəni bütünlüklə boyayır. Bunun baş vermə mexanizmi hələ də tam məlum deyil. Hüceyrə soması kimi dendritlər açıq-aydın qəhvəyi və qara rəngə boyanıb və onlar bütün uzunluğu boyunca izlənilə bilər. Bu da neyroanatomlara neyronlar arasındakı əlaqələri izləməyə və beynin və onurğa beyninin bir çox hissələrinin mürəkkəb şəbəkə quruluşunu görməyə imkan verir.

Qolgi boyanması aldehidlə sabitlənmiş sinir toxumasını kalium dikromat və gümüş nitrat ilə hopdurmaqla əldə edilir. Bu şəkildə boyanmış hüceyrələr gümüş xromatın mikrokristallaşması ilə doldurulur.

Texnikası

SynapseWeb-ə görə, bu, Qolgi boyama texnikası üçün reseptdir:

1. Formaldehidlə sabitlənmiş (və ya paraformaldehid-qlutaraldehid-perfused) beyin toxumasının blokunu (təxminən 10x5 mm) 2 gün ərzində 2% sulu kalium dikromatına salıb saxlamaq.
2. Bloku filtr kağızı ilə qısa müddətə qurutmaq.
3. Bloku növbəti 2 gün gümüş nitratın 2% sulu məhlulunada saxlamaq.
4. Bölmələri təxminən 20-100 µm qalınlığında kəsmək.
5. Etanolda tez susuzlaşdırmaq, təmizləmək və yerləşdirmək (məsələn, Depeks və ya Entalanda).

O vaxtdan bu texnika nümunəni qızıl xlorid, sonra oksalat turşusuna batıraraq, gümüşün natrium tiosulfatla çıxarılması ilə gümüş çöküntüsünü qızılla əvəz etmək üçün təkmilləşdirilmişdir. Bu, kiçik qızıl hissəcikləri ilə işarələnmiş ultrastruktur detallarla daha incə strukturu qoruyur.

Sitat

Ramon i Kajal Qolgi metodu haqqında demişdi:

Xrom-gümüş reaksiyasının möcüzəvi açılış gücünü və onun kəşfindən qaynaqlanan elm aləmində heç bir həyəcanın olmamasını öz gözlərimlə görüb təəccübləndiyimi bildirdim.

Recuerdos de mi vida, Cilt. 2, Elmi işin tarixi. Madrid: Mine, 1917, s. 76.

Xarici keçidlər

• Photomicrograph of a cortex cell stained with Golgi's. IHC Image Gallery.
• Golgi impregnations. Images of the brain of flies.
• Visualization of dendritic spines using Golgi Method. SynapseWeb. Includes a time-lapse study of Golgi impregnation.
• Berrebi, Albert: Cell Biology of Neurons: Structure and Methods of Study. (in PDF)